عزل وتشخيص جزيئة الدنا للبوغة الجديدة الكلبية من الأبقار في سوريا
AL-Furat University Journal for Resarches and Scientific Studies
2013, Volume 8, issue 29,pp 194-214| Cite as
ISOLATION AND DIAGNOSIS OF NEOSPORA CANINUM DNA FROM CATTLE IN SYRIA
authors
AL-Obaidii , W., Katranji,M.M., AL-Khaled, A.
Abstract

In order to isolate Neospora caninum in cell culture (Vero cell) and diagnosis the strains by using Real Time Polymerase Chain Reaction by using three different primers pairs(NC-5,Ncl and BPA4) from the tissue(brain, heart, skeletal muscle, placenta and blood) of 25 aborted fetus ,14 new borne calves and 39 cattle which suffer from abortion ,the study showed from culturing of tissue sample extract in tissue culture, Cyto Pathic Effect(CPE) this effect manifested by Vacule, Rupture in cell and presence of tachyzoites, when application the PCR technique in DNA template which extracted from infected cell culture showed presence increased fluorescent curve which indicate positive to Neospora caninum DNA,the highest percentage of infection in cell culture which infected with brain and skeletal muscle of Aborted fetus and Heart, skeletal muscle of calves ,while cell culture which infected with placenta of cow showed lowest percentage than blood sample the result show variance between clinical signs which appear in infected animals with the percentage of infection, the results of DNA detection of strains appear variation depending

on the strain, sample, animal

 

Key words : Neospora caninum-Vero cell -Cyto Pathic Effect -Real Time Polymerase Chain Reaction-Strains-DNA.

الكاتب
وسن امجد, محمد محسن , عبد الكريم الخالد
الملخص

تم جمع أعضاء (دماغ, قلب , عضلات هيكلية) من 25 جنينا مجهضا و14 عجلا إضافة إلى جمع عينات دم من العجول ,و39عينة دم ومشيمة من أبقار مجهضة ,  وذلك بهدف عزل طفيلي البوغة الجديدة الكلبية على خلايا الزرع الخلوي والكشف عن ذراري البوغة الجديدة الكلبية من خلال تقنية تفاعل سلسلة البوليمريز ذو الوقت الحقيقي , وباستخدام 3ازواج من المشرعات للذراري , حيث تبين من خلال تنمية العينات على خلايا الزرع الخلوي ظهور تأثيرات مرضية خلوية تتمثل بظهور فجوات, تمزق الخلايا وظهور الحيوانات التسرعية حيث كانت متباينة الشدة بين الأعضاء وبعدد التمريرات .وعدد إجراءات اختبار تفاعل سلسلة البوليمريز ذو الوقت الحقيقي على قوالب جزيئة الدنا المستخلصة من المزارع الخلوية التي أظهرت نمو للطفيلي تبين وجود منحنيات تألق ايجابية ازدادت تدريجيا للعينات الايجابية , حيث تبين أن أعلى نسبة للإصابة في لمزارع الخلوية المأخوذة من الأدمغة والعضلات الهيكلية للأجنة المجهضة والقلب والعضلات الهيكلية للعجول , بينما أظهرت عينات المشيمة للأبقار المجهضة التي تم إنماءها على المزارع الخلوية نسبة أقل مما هو عليه الحال من عينات الدم –وتباينت العلاقة مابين العلامات المرضية الظاهرة على الحيوانات المصابة ونسبة الإصابة بالطفيلي , بينت نتائج فحص الدنا للطفيلي للكشف عن ذراري البوغة الجديدة الكلبية , إن نسبة إصابة بالذراري متباينة حسب نوع الذرية ونوع العضو الذي تم عزل الطفيلي فيه .

الكلمات المفتاحية : البوغة الجديدة الكلبية,_ خلايا كلية أجنة القرود الإفريقية الخضراء _ التأثير المرضي الخلوي _ تفاعل سلسلة البوليمريز ذو الوقت الحقيقي _ ذراري _الدنا .